AP19678934 «Миелоидты супрессорлық жасушалардың генерациясындағы glycogen synthase kinase- 3α-ның рөлі»

AP19678934 «Миелоидты супрессорлық жасушалардың генерациясындағы glycogen synthase kinase- 3α-ның рөлі»

Жоба cипаттамасы

Клиникаға дейінгі және клиникалық зерттеулер жануарлардың ісік үлгілерінде және онкологиялық науқастарда MDSC-нің аберрантты кеңеюі мен жинақталуы ісікке қарсы иммундық жауаптың теріс реттеушісі және қатерлі ісік иммунотерапиясына тосқауыл ретінде әрекет ететінін жақсы құжаттады. Осылайша, MDSC конститутивті кеңеюінің негізгі молекулалық механизмдерін түсіндіру және осылайша туа біткен иммунитет немесе иммунотерапиялық тәсілдер арқылы ісік жасушаларын өлтіруге мүмкіндік беру үшін иммуносупрессивті ісік ортасын әлсірету негізгі зерттеушілер мен клиникалардың алдында тұрған өте өзекті мәселе болып табылады.

Жобаның мақсаты

Жобаның мақсаты – миелоидты супрессорлық жасушалардың генерациясына GSK-3α-ның ықтимал қатысуын зерттеу.

Күтілетін нәтижелер

Біз GSK-3α киназа белсенділігі MDSCs супрессорлық фенотипін құру және қолдау үшін қажет деп күтеміз. Осылайша, біз келесі дереу нәтижелерді күтеміз: 1) GSK3α-ны siRNA-делдалдық үнсіздендіру ex vivo генерацияланған миелоидты супрессорлық жасушалардың иммуносупрессивті функциясының әлсіреуіне әкеледі. 2) GSK3α-ны siRNA-делдалдық дыбыссыздандыру STAT3 және NF-κB транскрипция факторларының активтену/фосфорлану үлгісінің өзгеруіне әкеледі.

Жоба нәтижелерінің әлеуметтік-экономикалық әсері

Жобаның іргелі сипатына байланысты бірден әлеуметтік-экономикалық әсер болмайды. Алайда жақын арада күтілетін нәтижелер мен кейінгі зерттеулер онкологиялық науқастарда аберрантты жинақталған миелоидты супрессорлық жасушаларға бағытталған ақылға қонымды терапиялық тәсілдерді әзірлеу үшін пайдалы ақпарат береді, осылайша иммунотерапияның тиімділігін арттырады. Сайып келгенде, бұл әлемнің кез келген елінде, соның ішінде Қазақстанда қатерлі ісікке қарсы күреске байланысты негізгі экономикалық жүктемені жеңілдетеді.

Қолдану саласы

Жасушалық және молекулалық иммунология.

Потенциалды пайдаланушылар үшін ақпарат

Миелоидты супрессорлық жасушалар — инфекция және қатерлі ісік сияқты әртүрлі қабыну жағдайлары кезінде жедел миелопоэз арқылы көбейетін гетерогенді жетілмеген миелоидты жасушалар. Клиникаға дейінгі және клиникалық зерттеулер жануарлардың ісік үлгілерінде және онкологиялық науқастарда миелоидты супрессорлық жасушалардың аберрантты кеңеюі мен жинақталуы ісікке қарсы иммундық жауаптың теріс реттеушісі және ісік иммунотерапиясына тосқауыл ретінде әрекет ететінін жақсы құжаттады. Осылайша, конститутивті миелоидты супрессорлық жасушалардың кеңеюінің негізгі молекулалық механизмдерін түсіндіру және осылайша туа біткен иммунитет немесе иммунотерапиялық тәсілдер арқылы ісік жасушаларын жоюға мүмкіндік беру үшін иммуносупрессивті ісік ортасын әлсірету негізгі зерттеушілер мен клиникалардың алдында тұрған өте өзекті мәселе болып табылады.

Жобаны орындаушылар

Абдолла Н., PhD (биология), жоба жетекшісі, зертхана меңгерушісінің м.а. Хирш индексі: ORCID: https://orcid.org/0000-0002-4769-7824. Scopus ID: 57194001982.Web of Science ID: R-2193-2016.
Қали А., ғылым магистрі, аға ғылыми қызметкер. Хирш индексі: 3. ORCID: 0000-0002-5129-1165. Scopus ID: 57195580717. WoS ID: AAF-9781-2020.
Тлеулиева Р., б.ғ.к., жетекші ғылыми қызметкер. Хирш индексі: 6. Барлығы – 47 дәйексөз. ORCID: 0000-0001-8897-9986. Scopus ID: 6507202148. WoS ID: N-5634-2017.
Перфильева Ю.В. — PhD (биология), жетекші ғылыми қызметкер. Хирш индексі: ORCID: https://orcid.org/0000-0001-6803-0773. Scopus ID: 56823500600. Web of Science ID: AAF-9666-2020.
Дәулет Г., PhD докторанты

2023 жылғы орындалған жұмыстар мен алынған нәтижелер:

CD1 тышқан линиясынан тері асты Эрлих карциномасының үлгісі алынды. Бұл үшін алдымен азотта сақталған Эрлих жасушаларын қалпына келтіріп оларды сау CD1 тышқанның іш құысына енгіздік. Осы тышқаннан өміршеңдігі жоғары және қарқынды пролиферацияланып жатқан Эрлих жасушаларын Эрлих карциномасының ациты түрінде алдық. Осы алынған Эрлих карцинома жасушаларын сау CD1 тышқандарының тері астына енгіздік. Төрт апта өткен соң тышқандардың ісігі жобада көрсетілген мақсатқа және тапсырмаларға сай келесі тәжірибелерді жүргізуге жеткілікті деңгейде өсті, яғни Эрлих карциномасының үлгісі алынды. Осы үлгідегі тышқандардың сүйек кемігінен (BMC) және көкбауырдан жекелеген жасушаларды бөліп алып ағынды цитометриялық және in vitro супрессия талдауын қолдана отырып MDSC популяцияларын анықтау жүргізілді. Ағынды цитометрия нәтижелері CD11b⁺/Ly6C⁺/Ly6G⁺ MDSC жасушаларының деңгейі бақылау тышқандарымен салыстырғанда Эрлих карциномасы бар тышқандарда жоғарылағанын көрсетті.

2024 жылдың алғашқы жартысында орындалған жұмыстар мен алынған нәтижелер:

Эрлих карциномасының үлгісіндегі тәжірибелік және бақылау тобындағы тышқандардың көкбауырынан және сүйек кемігінен CD11b позитивті жасушалары, MDSC ретінде, магнитты сепарация әдісімен бөлініп алынды. Осы жасушалардан RIPA лизис буффері арқылы жалпы протеин экстракциясы алынды. Western blotting әдісімен MDSC генерациясына қатысы бар NF-κB және басқада протеиндердің экспрессиялану деңгейлері көрсетілді. Сау тышқандардың BMC жасушаларынан ex vivo MDSC генерациялау үшін алдымен Эрлих асциті дайындалды. In vitro жағдайында MDSC генерациялау үшін сау тышқандардың сүйек кемігі (BMC) жасушалары MDSC-индукциялайтын цитокиндері (GM-CSF және IL-6) және Эрлих асциті бар қоректік ортада өсірілді. Ағынды цитометрия және in vitro супрессия талдауы арқылы біздің in vitro үлгімізде супрессорлық қабылеті бар MDSC жасушаларының генерацияланатындығы көрсетілді.

2024 жылдың соңғы жартысында орындалған жұмыстар мен алынған нәтижелер:

Ex vivo генерацияланған MDSC жасушаларынан RIPA лизис буффері арқылы жалпы протеин экстракциясы алынды. Bradford әдісі арқылы алынған протеиндердің концентрациясы өлшенді. Western blotting әдісімен MDSC генерациясына қатысы бар NF-κB және басқада протеиндердің экспрессиялану деңгейлері көрсетілді.